腐植酸文献

一种高效提取高海拔地区土壤微生物总DNA的方法

作者:刘振静;杨凯;李潞滨;周金星
单位:中国林业科学研究院林业研究所国家林业局林木培育实验室;应用新技术北京市重点实验室
文献来源:北京农学院学报;   时间:1970-01-01

摘要: 为优质、高效地提取高海拔地区土壤微生物基因组DNA,在综合了多种土壤微生物DNA提取方法的基础上,采用双酶-改良酚氯仿DNA提取法提取了3份高海拔地区土壤样品的DNA,同时比较了其他3种常用方法的提取产率和纯度,该方法优于其他3种方法。采用PVP缓冲液预洗,去除腐殖酸;DNA提取液、溶菌酶和蛋白质酶K共同裂解土壤微生物细胞,保证获得大片段的DNA,提高DNA产率;酚氯仿法抽提,简便易操作,能有效地去除蛋白质和其他杂质。该方法是一种简便高效、适用于高海拔、生境类型复杂的土壤样品DNA提取的方法,DNA质量可满足PCR扩增的要求。

关键词: DNA;提取方法;高海拔;土壤